選購全波長(cháng)多功能酶標儀時(shí)，一定要考慮濾光系統和測定波長(cháng)

 

    全波長(cháng)多功能酶標儀簡(jiǎn)單的是用濾光方式來(lái)劃分。一般來(lái)說(shuō)，可以分為濾光片型和光柵型兩大類(lèi)。也有一些全波長(cháng)多功能酶標儀里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測，本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起，并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。

    光柵型濾光系統具有使用方便，可以進(jìn)行光譜掃描，靈活性等優(yōu)點(diǎn)。當然，濾光片系統也有其顯著(zhù)的優(yōu)勢，例如價(jià)格較為便宜，檢測靈敏度高，帶寬的可選擇性，可以進(jìn)行快速的濾光片切換，可配備有自動(dòng)加樣系統，在化學(xué)發(fā)光檢測中光線(xiàn)的透過(guò)率高。

    目前，濾光片系統應用更廣，因為它可以讓實(shí)驗者完成更多的試驗。

 

 

    一般全波長(cháng)多功能酶標儀的測定波長(cháng)在400～750nm或800nm之間，*可以滿(mǎn)足ELISA的顯色測定。目前國內常見(jiàn)的ELISA試劑盒所使用的標記用酶均為辣根過(guò)氧化物酶(HRP)，底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)，其在過(guò)氧化氫溶液的存在下，經(jīng)HRP作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯(lián)苯醌。當pH值為5．0左右時(shí)，DAB在450nm波長(cháng)處有大吸收，當pH值降為L(cháng) 0時(shí)，大吸收波長(cháng)移至492 nm，同時(shí)摩爾消光系數變大，顯色加深，因而常用強酸如硫酸或鹽酸終止反應。TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長(cháng)450nm處有大消光系數，如果HRP量少，H：O：和TMB過(guò)量時(shí)，則形成藍色的陽(yáng)離子根。降低pH，即可使藍色的陽(yáng)離子根轉變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩定90min。因此，450nm和492 nm兩個(gè)波長(cháng)是目前ELISA測定常用的。各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動(dòng)轉換的部件，可以同時(shí)安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應包括上述兩個(gè)波長(cháng)，有的酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。除了這兩個(gè)基本濾光片外，考慮到雙波長(cháng)比色的需要，還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長(cháng)的濾光片，其他濾光片可根據自己的需要選擇。有時(shí)，有的實(shí)驗室希望用酶標儀作微量生化測定，故全波長(cháng)多功能酶標儀生產(chǎn)廠(chǎng)家對其生產(chǎn)的酶標儀擴展了紫外檢測功能，此時(shí)需要一個(gè)340 nm波長(cháng)濾光片。此時(shí)，酶標儀的測定波長(cháng)范圍就成為340—750nm或800nm。