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毛細管電泳儀的六個(gè)分離模式

更新時(shí)間:2018-10-25      點(diǎn)擊次數:1930
     毛細管電泳儀的分離模式有毛細管電色譜、毛細管區帶電泳、毛細管膠束電動(dòng)色譜、毛細管凝膠電泳、毛細管等電聚焦電泳和毛細管等速電泳等。  
A.毛細管電色譜:  
    1、固定相:色譜固定相。  
    2、原理:在毛細管中填充固定相顆粒、管壁鍵合固定相或制成連續床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅動(dòng)流動(dòng)相,利用樣品各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數差異和本身淌度差異進(jìn)行分離。  
    3、特點(diǎn):分離效率比液相色譜高,選擇性比毛細管區帶電泳高,分析速度快,分析結果重復性好。  
    4、應用:是有發(fā)展前景的分離方法,填充毛細管電色譜在蛋白質(zhì)分析中有重要潛力。  
B.毛細管區帶電泳:  
    1、原理:根據樣品各組分質(zhì)荷比的不同進(jìn)行分離。  
    2、特點(diǎn):是毛細管電泳儀中基本、應用廣泛的一種分離模式。  
    3、應用:適用于分離蛋白質(zhì)、多肽和帶電荷的大小分子。  
C.毛細管膠束電動(dòng)色譜:  
    1、原理:在電泳緩沖溶液中加入表面活性劑,當溶液中表面活性劑濃度超過(guò)臨界膠束濃度時(shí),表面活性劑分子之間的疏水基團聚集在一起形成膠束,成為分離體系的準固定相,根據樣品各組分在水相和膠束相中的分配系數差異進(jìn)行分離。  
    2、特點(diǎn):可在分離離子型化合物的同時(shí)進(jìn)行中性物質(zhì)的分離。  
    3、應用:在各個(gè)領(lǐng)域顯示出廣泛的應用前景。  
D.毛細管凝膠電泳:  
    1、載體:聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠,前者應用多。  
    2、原理:分子篩效應。  
    3、特點(diǎn):峰形尖銳,是毛細管電泳儀中柱效高的一種分離模式。  
    4、應用:用于測定核酸片斷和蛋白質(zhì)相對分子量,是研究DAN排序的重要手段。  
E.毛細管等電聚焦電泳:  
    1、原理:利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子等電點(diǎn)的不同,在一個(gè)穩定、連續、線(xiàn)性的pH梯度中進(jìn)行分離。  
    2、特點(diǎn):分辨率高,區帶清晰且窄。  
    3、應用:可分離等電點(diǎn)差異小于0.01pH單位的兩種蛋白質(zhì),特別適合分離相對分子量相近而等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)組分。  
F.毛細管等速電泳:  
    1、原理:用淌度比樣品中任何組分的淌度都高的電解質(zhì)作為先導電解質(zhì),用淌度比樣品中任何組分的淌度都低的電解質(zhì)作為尾隨電解質(zhì),樣品組分夾在先導電解質(zhì)和尾隨電解質(zhì)之間,根據各自有效淌度的不同進(jìn)行分離。  
    2、特點(diǎn):區帶界面明顯,具有富集和濃縮作用。  
    3、應用:目前應用不多。  
 

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