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在使用超微量核酸蛋白測定儀的過(guò)程中我們容易對它造成什么誤區

更新時(shí)間:2018-10-19      點(diǎn)擊次數:1563
   在使用超微量核酸蛋白測定儀的過(guò)程中我們容易對它造成什么誤區
  
  超微量核酸蛋白測定儀設計特點(diǎn):
  
  1、雙光束、高精度、多色器光學(xué)檢測系統,像差校正光柵和二極管陣列檢測器提供可靠的檢測結果
  
  2、檢測光程固定,儀器內部沒(méi)有移動(dòng)的光學(xué)部件,檢測光程為10mm。
  
  3、采用超長(cháng)壽命的氙閃燈,開(kāi)機后無(wú)需預熱即可工作
  
  4、可選配5.7英寸彩色觸摸控制器進(jìn)行單機操作,也可連接電腦操作
  
  超微量核酸蛋白測定儀應用:
  
  用于生命科學(xué)領(lǐng)域的核酸蛋白定量分析,如進(jìn)行DNA、RNA、蛋白質(zhì)、細胞等樣品的紫外/可見(jiàn)光檢測。
  
  數據多種導出格式(EXCEL、PPT等)方便保存和數據統計分析。
  
  超微量核酸蛋白測定儀注意事項:
  
  1、偵測后立即使用拭鏡紙擦拭臺面。先取一張將上下臺面的液體吸走,再吸過(guò)樣品的面反折到內部,折迭四次后以單方向多次擦拭臺面(DNA擦5次,Protein擦20次)。
  
  2、同一滴液體只能做一次偵測,欲重復定量同一樣品,請擦掉前一滴,重新取出一滴進(jìn)行偵測。
  
  3、基本上核酸樣品可使用1~2ul做測量,隨各液體體積特性之不同會(huì )有不同體積需求,原則上不超過(guò)2ul。并請使用2ul避免體積不足導致液柱無(wú)法完整形成。唯蛋白質(zhì)樣品因呈色劑與蛋白質(zhì)本身特性,務(wù)必使用2ul進(jìn)行偵測。
  
  4、當軟件跳出錯誤訊息時(shí),請詳細閱讀并依指示進(jìn)行障礙排除。常發(fā)生的情形是在偵測過(guò)程液柱并未正確形成,軟件會(huì )出現以下訊息??上扔萌庋塾^(guān)察液柱是否未完整連接上下臺面,或樣品內有泡泡,將上臂拉起后,擦掉該滴樣品,再重新進(jìn)行偵測,必要時(shí)可將樣品體積加大至2ul。
  
  5、不可使用含有HydrofluoricAcid(HF)之樣品,其它無(wú)腐蝕性之液體皆可使用。
  
  超微量核酸蛋白測定儀的使用誤區:
  
  1)測量核酸時(shí)發(fā)現結果不準:首先要確定核酸樣品的純度,如果是DNA樣品,260/280比值應該在1.6-2.0之間。比值小于1.6說(shuō)明有蛋白類(lèi)物質(zhì)的干擾,大于2.0說(shuō)明有RNA的干擾。如果是RNA樣品,260/280應該大于2.0,如果值偏高如2.5以上,可能是RNA降解的原因,如果小于2.0說(shuō)明有蛋白類(lèi)物質(zhì)的干擾。我們還可以通過(guò)230nm、和320nm處的吸收峰來(lái)判斷樣品的純度,230表示存在以下污染物如:碳水化合物、多肽、苯酚等,核酸和蛋白在320nm處的吸收峰幾乎為零,所以如果有吸收說(shuō)明有雜質(zhì),可能是稠環(huán)芳香有機試劑的污染。
  
  2)適合測量純度高的蛋白樣品,不能測量含有雜質(zhì)的蛋白樣品:通過(guò)上面的公式我們能夠發(fā)現,c值是與吸光度A成正比的,如果樣品中含有雜質(zhì)成分,且雜質(zhì)在280處有吸收峰的話(huà)就會(huì )造成測量值不準,一般我們提蛋白過(guò)程中使用的有機試劑如果殘留的話(huà)就會(huì )造成測量蛋白值不準的情況。
  
  3)測量?jì)蓚€(gè)樣品中間務(wù)必要用吸水的面巾紙和蒸餾水清潔測量臂:如果不做清潔,殘留的樣品會(huì )對后來(lái)樣品的測量造成影響。切記不要用擦鏡紙擦拭,因為擦鏡紙不吸水。
  
  4)測量同一個(gè)樣品的時(shí)間不宜過(guò)長(cháng):因為上樣量很少,隨著(zhù)時(shí)間的推遲樣品會(huì )有所蒸發(fā),造成測量出來(lái)的濃度有誤差。
  
  5)如果測量值不是很準,建議可以把樣品稀釋到適當濃度再進(jìn)行測量。
  
  6)如果感覺(jué)機器的平衡性不好,可以通過(guò)以下方法檢測:以空氣為blank,反復測量空氣,兩次測量之間間隔5秒,測出的吸光度值應該小于0.04,說(shuō)明平衡性良好。
  
  

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